<html>

<head>
<meta http-equiv=Content-Type content="text/html; charset=windows-1250">
<META name="keywords" content="HPLC, teorie, chromatografie">

<title>Volba stacionární fáze na retenci solutů a jejich selektivitu</title>

<style>
<!--body
	{scrollbar-face-color: #FF0000;
	scrollbar-shadow-color: #00FFFF;
	scrollbar-highlight-color: #00FFFF;
	scrollbar-3dlight-color: #00FFFF;
	scrollbar-darkshadow-color: #00FFFF;
	scrollbar-track-color: #0000FF;
	scrollbar-arrow-color: #00FFFF;}

 /* Font Definitions */
 @font-face
	{font-family:Tahoma;
	panose-1:2 11 6 4 3 5 4 4 2 4;}
 /* Style Definitions */

h1
	{margin-top:5.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2 cm;
	text-align:justify;
	line-height:200%;
	font-size:10.0pt;
	font-family:Tahoma;
	font-weight:normal;}
h2
	{margin-top:6.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2cm;
	text-align:justify;
	line-height:150%;
	font-size:12.0pt;
	font-family:Tahoma;
	font-weight:bold;
	color:blue;}
h3
	{margin-top:5.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2cm;
	text-align:justify;
	line-height:150%;
	font-size:10.0pt;
	font-family:Tahoma;
	font-weight:bold;
	color:blue;}
h4
	{margin-top:5.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2cm;
	text-align:justify;
	line-height:150%;
	font-size:10.0pt;
	font-family:Tahoma;
	font-weight:bold;
	color:red;}
h5
	{margin-top:5.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2 cm;
	margin-bottom:5.0pt;
	text-align:justify;
	line-height:175%;
	font-size:8.0pt;
	font-family:Tahoma;
	font-weight:normal;}

h6
	{margin-top:6.0pt;
	margin-right:0.2cm;
	margin-left:0.2cm;
	text-align:justify;
	line-height:150%;
	font-size:8.0pt;
	font-family:Monotype Corsiva;
	font-weight:bold;
	color:red;}


-->
</style>

<script language="JavaScript">
<!--
function HighlightAnchor()
{
    if (window.event.srcElement.tagName == "A") 
        window.event.srcElement.style.color = "orange";
}

function LowlightAnchor()
{
    if (window.event.srcElement.tagName == "A") 
        window.event.srcElement.style.color = "blue";
}
// -->
</script>
</head>

<body lang=CS link=blue vlink=purple onmouseover="HighlightAnchor()"
onmouseout="LowlightAnchor()">

<a name="_top">

<h2>Volba stacionární fáze - vliv na retenci solutů a jejich selektivitu</h2>


<h1>Termodynamické chování chromatografovaných látek (retence a selektivita) určuje <b><a href="../Teorie/adsorbent.html" title="Otevřít ...">chemicky vázaná stacionární fáze</a></b> a dynamické vlastnosti (účinnost kolony a permeabilita) jsou dány strukturou a velikostí části nosiče. Jako nosič se nejčastěji používá silikagel, jehož povrchové hydroxylové skupiny se modifikují příslušnou chemickou reakcí s vhodnými organickými sloučeninami (ligandem), na jejichž charakteru závisí selektivita připravené fáze.</h1>


<h1>Při chromatografii na nepolární fázi se ovlivní retence látek množstvím nepolární fáze na nosiči (obsah uhlíku a délka alifatických řetězců). S rostoucí délkou vázaného alifatického řetězce roste i retence na nepolárních fázích:</h1>

<h3><p align=center><a name="_Obr_1"></a>Obr. 1 Závislost log k alkanů na počtu uhlíkových atomů v jejich molekule (n) na reverzní fázi s různými délkami vázaných alkylů (C4 až C18)</p></h3>

<tr> <td><p align=center><img border="0" src="Figure/stationary_phase_vliv_C.png"></p></td> </tr>

<h1>Použitím polárnějších stacionárních fází (např fenylová stacionární fáze) dochází ke zvýšení retence solutů a současně dochází ke změně selektivity aromatických sloučenin (vliv <span style='font-family:Symbol'>p</span>-<span style='font-family:Symbol'>p</span> interakce mezi stacionární fází a solutem).</h1>


<h1>Zvýšení polarity stacionární fáze roste retence solutů obdobně jako s rostoucí délkou alkylu stacionární fáze. Tohoto se dosáhne modifikací ligandu tak, že se začlenění polární skupina  (ligand) do organického uhlíkového řetězce stacionární fáze mezi povrch silikagelu a nepolární vrstvu.<sup><a href="#_edn1" name="_ednref1">[1]</a>,</sup><sup><a href="#_edn2" ame="_ednref2">[2]</a></sup></sup> Jako příklad je možné uvést komerčně dodávané sorbenty reverzní fáze SymmetryShield RP8, která má včleněnou do ligandu karbamátovou skupinu a nebo  Supelcosil  ABZ+ (Discovery RP-Amide C16), která má včleněnou amidickou skupinu: </h1>

<td width=100%>
  <p align=center><img border=0 src="Figure/modifikace_ligand.png"></p>
  </td>


<h1>Tento krok zmírňuje interakci analytu s povrchovými volnými silanolovými skupinami, zejména bazických polárních látek. Pravděpodobně dochází k interakci mírně polární skupiny s volnými silanolovými skupinami a zvýšením polarity nepolární fáze dochází ke zvyšující se adsorpci vody v mobilní fázi. Začleněním polární skupiny do ligandu vede ke změně selektivity, ale současně dochází k poklesu retence bazických analytů a zvýšení retence kyselých analytů na takto modifikovaných ligandech.</h1>


<h3>Literatura</h3>
<hr size=2 width="33%" align=left>

<h5><a href="#_ednref1" name="_edn1">[1]</a>. Neue U.D., Niederländer C.L., Petersen J.S.: US Patent 5,374,755 (1994).</h5>

<h5><a href="#_ednref2" name="_edn2">[2]</a>. Ascah T.L., Feibush B.: J. Chromatogr. 506, 357 (1990).</h5>



&nbsp;
<h5><a href="#top">[Top of Page]</a></h5>
&nbsp;

<!--- LAST MODIFIED --->
<h6>Last modified: 
<script language="javascript">
<!--
   datum = new Date (document.lastModified);
   mesic = new Array ('ledna', 'února', 'března', 'dubna', 'května', 'června', 'července', 'srpna', 'září', 'října', 'listopadu', 'prosince');
   document.write (datum.getDate() + '. ' + mesic[datum.getMonth()] + ' ' + datum.getYear());
//-->
</script>
</h6>
<!--- LAST MODIFIED END--->
</body>
</html>
�